Реклама


G-квадруплексы

G-квадру́плексы (англ. G-quadruplex, а также G-tetrads или G4) — последовательности нуклеиновых кислот, обогащенные гуанином и способные образовывать структуры из четырёх цепей. Цепи нуклеиновых кислот из гуанозиновых олиго- и полинуклеотидов способны связываться друг с другом при наличии моновалентного катиона небольшого размера, чаще всего — калия. С помощью дифракционного анализа было показано, что такие поли(G)-нити представляют собой новый тип укладки ДНК, четырёхцепочечную спираль, где четыре гуаниновых основания из разных цепей образуют плоскую структуру, удерживаемую парными взаимодействиями G-G (рис. 1). Такие структуры отличаются высокой стабильностью в растворе и называются гуаниновыми (G)-квартетами, или G-тетрадами. Каждый G-квартет скреплен в сумме восемью водородными связями, образованными взаимодействием Уотсон-Криковской стороны одного гуанинового основания с Хугстиновской стороной другого. G-квадруплексы могут быть также образованы короткими олигонуклеотидами с соответствующей последовательностью, которую можно схематически записать как GmXnGmXoGmXpGm, где m — количество гуанинов в G-блоке. Эти гуанины обычно непосредственно задействованы в образовании G-тетрад. Xn, Xo и Xp могут быть комбинацией любых остатков, включая G; такие участки формируют петли между G-тетрадами.

Рис 1. Структура G-квадруплекса. Слева: G-квартет. Справа: G-квадруплекс из трёх квартетов

Содержание

Источники G-тетрадных мотивов[ | код]

Нуклеиновые кислоты, содержащие G-тетрадный мотив, чрезвычайно широко представлены во всех открытых на данный момент геномах. Такие мотивы были обнаружены в промоторных регионах, интронах и сайтах переключения в составе последовательности генов иммуноглобулинов, «горячих точках» рекомбинации и др. При анализе генома человека было выявлено более 350 000 последовательностей, теоретически способных принимать конформацию квадруплексов. По-видимому, квадруплексы находятся в динамическом равновесии с другими формами ДНК, например, обычным дуплексом[1].

Теломерные квадруплексы[ | код]

G-квартеты также представлены в ДНК на концах эукариотических хромосом, известных как теломеры. Теломерная ДНК представляет собой тандемные повторы коротких поли-G-блоков, которые иногда включают в себя адениловые или тимидиловые нуклеотиды: (GGTTAG)n, или (TTAGGG)n; при этом тип повтора является видозависимым: например, повтор (TTAGGG)n характерен для млекопитающих.

Функция теломер заключается в защите хромосомных концов от нежелательных повреждений в результате рекомбинации или воздействия нуклеаз. Человеческая теломерная ДНК в соматических клетках в среднем составляет 8-10 тысяч пар оснований. Терминальные же 100—200 нуклеотидов с 3'-конца представляют собой однотяжевой «хвост», конформационно ничем не ограниченный. В живых клетках этот «хвост» ассоциирован с белком POt1, в отсутствие же этого белка однотяжевая теломерная ДНК способна складываться и димеризоваться, формируя четырёхцепочечные шпильки, которые могут стабилизироваться формированием гуаниновых тетрад. Другой способ стабилизации такой ДНК — формирование внутримолекулярных G-квартетов путём многократного складывания.

Квадруплексы в промоторных регионах[ | код]

Ряд участков ДНК в промоторных регионах генов человека способен принимать конформацию квадруплексов, тем самым обеспечивая регуляцию экспрессии генов. К белкам, гены которых могут регулироваться подобным образом, относятся, например, фактор транскрипции с-MYC[2], нарушение которого часто бывает связано с лимфомой Бёркитта[3], протоонкогены RET[4], Bcl-2[5], c-Kit[6], фактор роста эндотелия сосудов[7] и др.

Квадруплексы в 5'-нетранслируемой области мРНК[ | код]

Предполагаемая модель регуляции генов при наличии G-квадруплекса[8]

Биоинформатический анализ генома человека выявил, что около 3 000 мРНК содержат в своей 5'-нетранслируемой области один или несколько квадруплексов[9]. Квадруплекcы, расположенные в 5'-нетранслируемой области, могут участвовать в регуляции экспрессии генов на уровне трансляции[10]. Примерами таких матричных РНК человека являются мРНК рецептора эстрогена[11], внеклеточной металлопротеиназы[12], NRAS-протоонкогена[9] и др.

Синтетические квадруплексы[ | код]

Нуклеиновые кислоты, как и белки, способны к избирательному связыванию различных молекул. Такие способные к специфическому связыванию олигонуклеотиды называют аптамерами. Относительно большой процент аптамеров содержит в своей структуре квадруплекс, который выполняет функцию стабилизации всей молекулы[13][14].

На сегодняшний день существует достаточно быстрый и эффективный способ получения ДНК- и РНК-аптамеров, способных связываться с практически любой более-менее крупной молекулой — SELEX. При помощи SELEX за последние 2 десятилетия было создано множество аптамеров, которые можно использовать для детекции различных веществ, а также в качестве основы для разработки лекарственных препаратов[15].

Примечания[ | код]

  1. Huppert J. L., Balasubramanian S. Prevalence of quadruplexes in the human genome. (англ.) // Nucleic acids research. — 2005. — Vol. 33, no. 9. — P. 2908—2916. — DOI:10.1093/nar/gki609. — PMID 15914667. [ис]
  2. Yang D., Hurley L. H. Structure of the biologically relevant G-quadruplex in the c-MYC promoter. (англ.) // Nucleosides, nucleotides & nucleic acids. — 2006. — Vol. 25, no. 8. — P. 951—968. — DOI:10.1080/15257770600809913. — PMID 16901825. [ис]
  3. Spender L. C., Inman G. J. Developments in Burkitt's lymphoma: novel cooperations in oncogenic MYC signaling. (англ.) // Cancer management and research. — 2014. — Vol. 6. — P. 27—38. — DOI:10.2147/CMAR.S37745. — PMID 24426788. [ис]
  4. Guo K., Pourpak A., Beetz-Rogers K., Gokhale V., Sun D., Hurley L. H. Formation of pseudosymmetrical G-quadruplex and i-motif structures in the proximal promoter region of the RET oncogene. (англ.) // Journal of the American Chemical Society. — 2007. — Vol. 129, no. 33. — P. 10220—10228. — DOI:10.1021/ja072185g. — PMID 17672459. [ис]
  5. Agrawal P., Lin C., Mathad R. I., Carver M., Yang D. The major G-quadruplex formed in the human BCL-2 proximal promoter adopts a parallel structure with a 13-nt loop in K+ solution. (англ.) // Journal of the American Chemical Society. — 2014. — Vol. 136, no. 5. — P. 1750—1753. — DOI:10.1021/ja4118945. — PMID 24450880. [ис]
  6. Hsu S. T., Varnai P., Bugaut A., Reszka A. P., Neidle S., Balasubramanian S. A G-rich sequence within the c-kit oncogene promoter forms a parallel G-quadruplex having asymmetric G-tetrad dynamics. (англ.) // Journal of the American Chemical Society. — 2009. — Vol. 131, no. 37. — P. 13399—13409. — DOI:10.1021/ja904007p. — PMID 19705869. [ис]
  7. Sun D., Liu W. J., Guo K., Rusche J. J., Ebbinghaus S., Gokhale V., Hurley L. H. The proximal promoter region of the human vascular endothelial growth factor gene has a G-quadruplex structure that can be targeted by G-quadruplex-interactive agents. (англ.) // Molecular cancer therapeutics. — 2008. — Vol. 7, no. 4. — P. 880—889. — DOI:10.1158/1535-7163.MCT-07-2119. — PMID 18413801. [ис]
  8. Bugaut A, Balasubramanian S (2012). «5'-UTR RNA G-quadruplexes: translation regulation and targeting». Nucleic Acids Res. DOI:10.1093/nar/gks068. PMID 22351747.
  9. 1 2 Kumari S., Bugaut A., Huppert J. L., Balasubramanian S. An RNA G-quadruplex in the 5' UTR of the NRAS proto-oncogene modulates translation. (англ.) // Nature chemical biology. — 2007. — Vol. 3, no. 4. — P. 218—221. — DOI:10.1038/nchembio864. — PMID 17322877. [ис]
  10. Bugaut A., Balasubramanian S. 5'-UTR RNA G-quadruplexes: translation regulation and targeting. (англ.) // Nucleic acids research. — 2012. — Vol. 40, no. 11. — P. 4727—4741. — DOI:10.1093/nar/gks068. — PMID 22351747. [ис]
  11. Balkwill G. D., Derecka K., Garner T. P., Hodgman C., Flint A. P., Searle M. S. Repression of translation of human estrogen receptor alpha by G-quadruplex formation. (англ.) // Biochemistry. — 2009. — Vol. 48, no. 48. — P. 11487—11495. — DOI:10.1021/bi901420k. — PMID 19860473. [ис]
  12. Morris M. J., Basu S. An unusually stable G-quadruplex within the 5'-UTR of the MT3 matrix metalloproteinase mRNA represses translation in eukaryotic cells. (англ.) // Biochemistry. — 2009. — Vol. 48, no. 23. — P. 5313—5319. — DOI:10.1021/bi900498z. — PMID 19397366. [ис]
  13. Tucker W. O., Shum K. T., Tanner J. A. G-quadruplex DNA aptamers and their ligands: structure, function and application. (англ.) // Current pharmaceutical design. — 2012. — Vol. 18, no. 14. — P. 2014—2026. — PMID 22376117. [ис]
  14. Gatto B., Palumbo M., Sissi C. Nucleic acid aptamers based on the G-quadruplex structure: therapeutic and diagnostic potential. (англ.) // Current medicinal chemistry. — 2009. — Vol. 16, no. 10. — P. 1248—1265. — PMID 19355883. [ис]
  15. Ni X., Castanares M., Mukherjee A., Lupold S. E. Nucleic acid aptamers: clinical applications and promising new horizons. (англ.) // Current medicinal chemistry. — 2011. — Vol. 18, no. 27. — P. 4206—4214. — PMID 21838685. [ис]

Литература[ | код]

Книги[ | код]

Статьи[ | код]

Реклама